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Cat. Number
HA11678
Chemical Name
dCas9蛋白
CAS Number
HA11678
Qty 1
100pmol
Qty 2
1000pmol
Storage condition
-20°C
References

来自 S. pyogenes 的 Cas9 核酸酶是依赖于 RNA 介导的内切核酸酶,可以特异地切割双链 DNA(在 DNA PAM 存在的情况下,也可以切割单链 DNA 或单链 RNA)。Cas9 切割位点位于目标序列 (target sequence)内,离 PAM(NGG)区 3 个碱基。PAM 对于 Cas9 的识别和切割都是必需的。 因为反应需要添加 RNA(sgRNA 或者 crRNA:tracrRNA),整个体系,包括 Cas9 酶都不能含有任 何 RNase 活性。其中,Cas9 中的 HNH 和 RuvC 结构域分别负责切割靶标 DNA 中与 sgRNA 配对和 非配对的链。在本产品中,Cas9 的 H840 和 D10 都被突变为 A,使 Cas9 的 HNH 和 RuvC 结构域均 失活,获得 dCas9 蛋白。因此,dCas9 只有结合靶标 DNA 的活性,而没有切割靶标 DNA 的活性。


dCas9100 pmol (1 pmol/μL) 1000 pmol (10 pmol/μL)
10× Buffer 31 mL 1 mL× 2

推荐反应体系(20 μL):

组分体积
10×Buffer 32 µL
250 nM sgRNA2 µL
1 pmol/µL dCas91 µL
30 nM substrate DNA2 µL
Nuclease-free water up to
37 °C培养30 min至1 h,然后通过非变性核酸电泳等方法对实验结果进行检测

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. 产品仅供科研使用,不用于临床诊断。

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