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Cat. Number
HM0089-1
Chemical Name
SP6 RNA聚合酶
Mol. Weight
单体约98kDa
Appearance
液体
Application Notes
BR,生化研究
Synonym
SP6 RNA Polymerase 其他名称:SP6核糖核酸聚合酶
Storage condition
-20℃
References

来源:大肠杆菌细胞,含有编码相应RNA聚合酶的克隆基因
浓度:20u/ul(≥100U/ul,HC)
活力定义:是指在37℃、60分钟内将1nmol AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81)光吸收形式)所需的酶量
酶活性分析混合物:40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亚精胺,0.5mM 各种NTP, 0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相应启动子序列的质粒DNA
保存缓冲:每种聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污剂和50%(V/V) 甘油
5×转录缓冲液:200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亚精胺
抑制剂:金属螯合剂,当NaC1或KC1浓度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶)时,酶活性降低超过50%,硫酸铵可使酶活性降低超过50%
失活:加入EDTA或者70℃加热10分钟
质量控制:相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能测试:体外转录反应
特点:合成掺入特殊核苷酸,如氨基-、生物素-、荧光素-、地高辛-标记的核苷酸
性状:液体,SP6核糖核酸聚合酶是一种依赖DNA的聚合酶,对SP6启动子序列表现高度专一性。用该酶合成RNA,仅能以SP6 DNA或克隆在SP6 启动下游的DNA作为合成模板。该酶能以32P,35S及3H标记的核苷三磷酸为底物
用途:生化研究。合成标记和未标记的RNA,用于杂交、体外RNA翻译;作为RNA、siRNA、RNase酶切保护分析的底物以及基因组DNA测序的模板;研究RNA的二级结构和RNA-蛋白质相互作用、RNA剪接;标记的RNA探针合成,用于印迹实验、原位杂交、microarray杂交

SP6 RNA聚合酶SP6 RNA Polymerase  BR2000U¥680
SP6 RNA聚合酶SP6 RNA Polymerase  BR 500U¥450

 

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